1768年,意大利生物学家斯帕兰札尼 (Lazzaro Spallanzani, 1729-1799) 抓住了这一问题。
他首先将烧瓶中的营养液长时间加热,以消除溶液中、溶液上面的空气中以及瓶内壁的微生物,然后再将烧瓶密封防止新孢子进入。
经过长时间静置,他发现营养液中并没有微生物的产生,这意味着微生物不是自然发生的。
然而这一争论尚未结果。支持自然发生说的人坚持:由于长时间的煮沸,斯帕兰札尼破坏了空气中的某些“生机”,无法接触新的空气,微生物便不能繁殖。一个世纪以后,才由巴斯德彻底消除了这一异议。